原装进口维生素B12测定用培养基方法 基因组DNA污染*剂供应

	维生素B12测定用培养基M036由国际着名Himedia Laboratories生产，具有国际认证的GMP，CE和FDA，ISO9001：2008，威正翔禹生物科技,原装进口维生素B12测定用培养基方法，基因组DNA污染*剂供应，上海威正翔禹生物科技有限公司，ISO13485：2003等证书，成分完全符合


	《GB 5413.14-2010食品*国家标准 婴幼儿食品和乳品中维生素B12的测定》，美国药典和美国公职分析化学师协会（AOAC）推荐用培养基。


	


	维生素B12测定用培养基原理


	乳酸杆菌生长需要特别的营养，因而在非选择性培养基上很难生长。维生素测定用培养基用于维生素的微生物法测定。该方法需要三种培养基：即维持培养基，用于保持菌种活力；接种培养基，用于测试菌液的制备；测定用培养基，用于待测维生素的定量。


	


	维生素B12测定用培养基，不含维生素B12，但包含所有其他维生素和必要养分，用于莱士曼乳酸杆菌（ATCC 7830）的生长。莱士曼乳酸杆菌（ATCC 7830）作为测定用菌，较早由Capp等人描述（1）并被美国药典和美国分析化学家协会（AOAC）所推荐（2，3）。


	


	用已知稀释度的维生素B12标准廾品，可以制备标准曲线（2，3）。


	


	测试菌液的制备是将将活化后的菌株接种到乳酸杆菌肉汤培养基中，推荐在37°C 孵育24 小凵时，威正翔禹生物科技,原装进口维生素B12测定用培养基方法，基因组DNA污染*剂供应，上海威正翔禹生物科技有限公司，再离心、清洗、重悬于10 ml 生理盐水中，再通过浊度分析或酸度分析，确定生长反应。


	


	 用维生素B12的浓度及对应的吸光度制作标准曲线。用标准曲线可确定待测样本中的维生素B12的浓度。


	


	应非常小心地避免培养基和玻璃器具的污染。应使用洁净的无去污剂的玻璃器具。少量的外源物质的污染可能导致错误的结果。


	


	用于接种的测定菌应在**的培养基中培养。


	维生素B12测定用培养基应用


	


	维生素B12测定用培养基推荐采用莱士曼氏乳酸杆菌（ATCC 7830）作为测定用菌，进行维生素B12的微生物法测定。


	


	质量控制


	?外观——奶油色至黄色，具均匀性，倾向形成可*分解成粉末状的软块


	?制备好的培养基颜色和透明度——淡琥珀色透明溶液，可能有轻微沉淀


	?配比浓度——在25°C下8.5%w/v(8.5g/100ml水）水溶液，pH值为6.1±0.2


	?pH值——5.90-6.30


	


	配置


	


	称取8.45g干粉培养基溶于100ml蒸馏水，必要时加热使培养基完全溶解。混匀，使轻微的沉淀均匀分布。测定时，分装试管，每管为5ml培养基（包含标准品和待测样品）。加蒸馏水，使总体积达到10ml。高压消毒15磅121°C 5分钟。立即冷却培养基。每个试管(10 ml)的维生素B12水平为0、0.025、0.05、0.075、0.1、0.125、0.15、0.2 ng时，均可获得满意结果。


	


	培养反应


	


	进行微生物法测定维生素B12。采用莱士曼氏乳酸杆菌（ATCC 7830），35-37°C孵育18-24小时。


	


	生长状况


	


	随着测定管标准品水平升高，（美国药典维生素B12标准水平，0，0.025,0.050，0.075,0.1,0.125,0.150,0.2ng)，目标菌生长逐渐递增，伴随着620nm处吸光度的增加。


	


	文献


	


	1.  Capps B. E., Hobbs M. H. H. and Fox S. H., 1949, J. Biol. Chem., 178:517.


	2. The United States Pharmacopoeia, 2006, USP29/NF24, The United States Pharmacopeial Convention, Rockville, MD.


	3.  H. Williams, (Ed.), 2005, Official Methods of Analysis of the Association of Official Analyti